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    外泌体示踪试剂盒

    外泌体是由细胞分泌的直径约为30~150nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构。外泌体携带多种功能分子如蛋白、核酸和脂质,参与细胞间的交流、物质运输以及正常的生理过程维持,与疾病的发生进展密切相关。外泌体功能研究中首先需要检测外泌体是否被受体细胞摄取。应用最多的方法是借助荧光标记进行外泌体示踪。其中最值得需要关注的问题是荧光标记完后是否能够完全去除游离荧光,这往往会影响后续实验结果的可靠性。以往常规的方法是利用超速离心去除游离荧光,但该方法依赖于超速离心机,且耗时长,回收率低,增加了实验的难度和风险。


    为了解决以上难点,太阳集团官方版开发了外泌体快速荧光标记试剂盒(Exosome Staining Q3 kit,该试剂盒最大的优点是标记全程无需超速离心,而且30分钟内即可完成外泌体荧光标记与纯化,得到的荧光标记外泌体可用于细胞吞噬与示踪实验。



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    产品特点


    1.简捷快速:30min内可完成外泌体标记纯化全过程。

    2.高标记效率:10μg外泌体标记效率大于90%

    3.高回收率:10μg外泌体纯化回收率大于70%。


    试剂盒实测数据


    荧光分光光度计检测经过荧光吸附柱(试剂盒中提供)前后的荧光染料,结果显示荧光吸附柱纯化后的染料相对荧光单位显著下降。表明荧光吸附柱可有效去除游离荧光(图1)

     

            图1 荧光吸附柱去除游离荧光测试



    取5μg ,10μg外泌体分别进行3次荧光标记,经纳米流式NanoFCM检测,标记效率均大于90%,且具有良好的重复性(图2)。


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    图2 外泌体标记效率测试



    取5μg ,10μg外泌体分别进行3次荧光标记(绿色)重复实验,纯化后的外泌体,经qNano(TRPS外泌体计数技术)计数检测,标记后的外泌体的回收率均大于70%,且具有较好的重复性(图3)。


    图3 荧光标记外泌体的纯化回收率测试



    终浓度5μg/ml荧光标记HepG2来源外泌体与Raw264.7细胞共孵育24h,DAPI染色后荧光显微镜下可观察到细胞吞噬的外泌体(图4)。



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                  图4 荧光显微镜观察细胞吞噬荧光标记纯化的外泌体(400×)



    终浓度5μg/ml荧光标记外泌体与细胞共孵育0h、4h、24h,流式细胞仪检测结果显示荧光信号逐渐增强,说明吞噬外泌体的细胞数量随着孵育时间的延长而增加(图5)。

     


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      图5 流式细胞仪检测细胞吞噬荧光标记纯化的外泌体

    点击下载:太阳集团官方版-外泌体示踪试剂盒产品说明书